PCR實驗室裝修、設計及各區儀器、輔助設備、耗材圖解
臨床基因擴增檢驗實驗室又稱分子實驗室、PCR實驗室,已逐漸成為檢驗領域必不可少的一部分,原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應當設置以下區域:試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。
這4個區域在物理空間上必須是完全相互獨立的,各區域無論是在空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分隔狀態,不能有空氣的直接相通。
各個區因為功能的不同,常常使用的儀器也是有所不同,今天給大家分享PCR實驗室設計及不同實驗分區基礎應該配備那些物品與儀器?
PCR實驗室介紹
PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別,精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。
PCR實驗室平面設計布局
PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。 各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
臨床PCR實驗室設計的“16字口訣”:各區獨立、注意風向、因地制宜、方便工作。
(1)在物理空間上,必須是完全相互獨立的,各 區域無論是在空閑還是在使用中,應始終處于 完全的分隔狀態; (2)不能有空氣的直接相通。
理想的PCR實驗室設計A
理想的PCR實驗室設計B
PCR實驗室區域圖解
試劑儲存和準備區 (PCR 1區)
功能:貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。
標本制備區(PCR 2區)
功能:核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作,應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規范的要求。
擴增區(PCR 3區)
功能:DNA擴增及檢測。
產物分析區 (PCR 4區)
功能:擴增片段的進一步分析測定,如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。(開展項目不同對應不同儀器)
PCR實驗室合并問題
PCR不同區域可合并情況(一)
場景:使用實時熒光PCR儀依據:衛生部辦公廳關于印發《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》的通知;醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛辦醫政發〔2010〕194號合并:擴增區、擴增產物分析區可合并
PCR不同區域可合并情況(二)
場景:采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀依據:衛生部辦公廳關于印發《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》的通知;醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛辦醫政發〔2010〕194號合并:標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。
PCR實驗室裝修
1、實驗室墻壁、頂板和地板應當光滑、易清潔、防滲漏并耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑,不得在實驗室內鋪設地毯和懸掛窗簾。實驗室的墻體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好、所有陰角采用圓弧形線條過渡;墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;墻體和吊頂建議使用彩鋼板。
2、地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
3、燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點。實驗室應設應急照明裝置,同時考慮合適的安裝位置,以保證人員安全離開實驗室。
4、有可靠的電力供應和應急照明。每個房間必須裝有紫外線殺菌燈,殺菌燈的安裝高度在1.8~2.1m之間。
5、傳遞窗內部安裝有紫外燈,供消毒用。
6、應配備足夠的固定電源插座,避免多臺設備使用共同的電源插座。應有可靠的接地系統,應在關鍵節點安裝漏電保護裝置或監測報警裝置。
7、實驗室臺(桌)柜和座椅等應穩固和堅固,邊角應圓滑。實驗臺面應防水,并能耐受熱、有機溶劑、酸堿、消毒劑及其他化學劑。一般采用環氧樹脂臺面。
8、實驗臺中的櫥柜和實驗臺應牢固,實驗臺、柜和其他設備之間應保持一定距離,以便清潔。
9、實驗室門為凈化門,應有可視窗并帶自動閉門器,實驗室的門與門不能相對開啟,必須錯位開啟。并達到適當的防火等級,門鎖及門的開啟方向應不妨礙室內人員逃生。
10、實驗室應設洗手池,水龍頭開關宜為非手動式,宜設置在靠近出口處。
11、給水管道應設置倒流防止器或其他有效的防止回流的裝置;給排水系統應不滲漏,下水應有防回流設計。
12、應配備適用的應急器材,如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。
13、應配備適用的通訊設備。